鸭Toll样受体3实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋凯杰

作者： 宋凯杰;陈宗艳;黄云秀;李传峰;孟春春;李丹丹;张淼涛;刘光清

作者机构：

关键词： TLR3;荧光定量PCR;北京鸭

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 23 卷 03 期

页码： 42-49

摘要： 根据鸭Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)的基因序列保守区设计特异性引物,以鸭β肌动蛋白(β-actin)mRNA为内参,建立了一种检测鸭TLR3 mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法。该方法的标准曲线在1×102~1×108copies/μL范围内,具有良好的线性关系,相关系数和扩增效率均在0.9以上。熔解曲线显示,PCR产物为单峰,具有高度扩增特异性。重复性结果表明,该方法组内、组间变异系数均小于3%,最低检测浓度达100 copies/μL。利用该方法检测了TLR3在鸭组织器官中的表达和分布情况,结果表明,TLR3在鸭子的各种组织或器官中均有分布,其中以气管的表达水平最高,而在脾脏的表达水平最低。该检测方法的成功建立为研究TLR3在鸭天然免疫过程中的生物学功能提供了良好的技术手段。

分类号： S834

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