H3N2亚型猪流感病毒的反向遗传系统的构建及PB2K627E突变对病毒复制能力和致病力的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宫晓倩

作者： 宫晓倩;汪秀会;阮宝阳;刘晓敏;周艳君;郑浩;童武;李泽君;童光志;于海

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;H3N2;PB2K627E;致病力;反向遗传操作;空斑;肺脏组织;生长曲线;遗传系统;重组质粒

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年卷期： 2015 年

页码： 1

收录情况： CSCD

摘要： 引言为了探究PB2蛋白的第627位氨基酸对于人源的H3N2猪流感病毒的复制能力和致病力的影响,本实验构建了猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005(H3N2)的反向遗传操作技术平台,以之为基础,通过细胞和小鼠上的实验来探究该病毒的PB2-627位由K突变为E后对其复制能力和致病力的影响。材料与方法猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005(H3N2)保存于本实验室。通过RT-PCR进行八基因片段的扩增。然后将其连到PBD双向表达载体上,转化,提质粒,获得八个阳性重组质粒。将八质粒共转染293-T细胞,得到少数病毒粒子后,接到MDCK细胞上,使病毒大...

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