橡胶草悬浮细胞遗传转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘明乾

作者： 刘明乾;吴绍华;田郎;张世鑫;李言;田维敏

作者机构：

关键词： 橡胶草;悬浮细胞;遗传转化;农杆菌

期刊名称： 热带生物学报

ISSN： 1674-7054

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 176-182

摘要： 橡胶草(Taraxacum koksaghyz Rodin),也称为俄罗斯蒲公英,是菊科菊苣族蒲公英属多年生宿根型草本植物,目前被认为是一种潜在的产胶替代植物和研究橡胶生物合成的理想模式植物。为了建立橡胶草悬浮细胞的遗传转化体系,笔者测定了悬浮细胞对农杆菌抑菌剂替卡西林(Ticarcillin)以及对潮霉素(Hygromycin B)的敏感性;采用携带p CAMBIA1302的根癌农杆菌GV3101侵染悬浮细胞,用绿色荧光蛋白(GFP)和潮霉素来检测转化的成功率。结果表明:0~300 mg·L-1的Ticarcillin对悬浮细胞的生长和增殖没有影响,用于进行抗性愈伤筛选的潮霉素适宜质量浓度为10 mg·L-1。抗性愈伤的绿色荧光镜检(GFP检测)以及潮霉素和GFP基因的PCR检测均表明,将OD600值为0.6的携带p CAMBIA1302农杆菌按照细胞菌液与悬浮细胞的比例为1∶1.2混合侵染30 min后移至共培养基培养10 d,再移至选择培养基进行筛选培养可高效获得转基因阳性的愈伤组织。本研究为进一步优化橡胶草悬浮细胞遗传转化体系奠定了基础。

分类号： S576

  • 相关文献

[1]甘薯悬浮细胞系的建立及对抗草甘膦基因的遗传转化. 蒲志刚,张婷,李明,屈会娟,谭文芳,杨松涛,王大一,阎文昭. 2015

[2]土壤宏基因组中抗草甘膦新基因的克隆与转化水稻的研究. 王云鹏,马景勇,马瑞,马建,刘文国. 2014

[3]根癌农杆菌介导的高粱遗传转化体系的建立. 肖军,石太渊,郑秀春,段有厚. 2004

[4]农杆菌介导巨桉Eg5高效遗传转化. 郭利军,曾炳山,刘英. 2013

[5]根癌农杆菌介导花生遗传转化体系的建立. 高明,谭化,王云鹏,陈雪艳,刘艳芝. 2013

[6]大豆体细胞胚胎发生与农杆菌介导的遗传转化. 王萍,王罡,季静,曾凡亭,黄彬城,曹江,吴颖. 2004

[7]农杆菌介导的花生遗传转化现状与分析. 袁美,李双铃,李海渤,张成松. 2003

[8]根癌农杆菌介导转化马铃薯研究. 朱英,刘永翔,黄永会,邱礽,刘作易. 2013

[9]农杆菌介导转化大丽轮枝茵的体系优化. 陈天子,袁洪波,杨郁文,刘蔼民,张保龙. 2011

[10]根癌农杆菌介导合欢转TaNHX2基因体系的优化. 周祥明,郝志愚,夏时云,王姝,宋建. 2013

[11]泡桐遗传转化系统的建立. 戴群,何放亭. 1999

[12]农杆菌介导小麦成熟胚愈伤组织的遗传转化研究. 陈立国,后猛,王玉海,崔发,王洪刚. 2007

[13]影响农杆菌介导的黄瓜抗虫基因遗传转化体系的因素研究. 魏爱民,张文珠,杜胜利,韩毅科,张桂华,张历. 2006

[14]农杆菌介导的马铃薯转化研究进展. 张丽,宋玉霞,巩檑,颉瑞霞,甘晓燕. 2015

[15]大豆生物工程研究进展. 程林梅,孙毅,岳焕荣. 2001

[16]多基因表达载体KCTB转化宁夏枸杞的研究. 朱永兴,曹鹏,许兴,孟青青,赵子丹. 2010

[17]影响农杆菌介导的水稻遗传转化效率的因素. 施利利,王松文,联系作者,蔡宝立,孙宗修,张欣,刘霞. 2003

[18]农杆菌介导的葡萄转化研究进展. 张丽,王敬东,宋玉霞. 2012

[19]农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体系研究进展. 张婧,包爱科,柴薇薇,刘林波,王锁民. 2020

[20]抗旱调控基因DREB2A转化辽荞5号的研究. 丰明,陈庆富,葛维德,薛仁风. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序