家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 汤强

作者： 汤强;方玲;章玉萍

作者机构：

关键词： G蛋白α亚基;BmGα73B;RT-PCR;克隆;原核表达

期刊名称： 中国蚕业

ISSN： 1007-0982

年卷期： 2012 年 03 期

页码： 19-22

摘要： 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。

分类号： S881.26

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