文献类型: 中文期刊
第一作者: 贺亚南
作者: 贺亚南;陈晓丽;任晓霞;郝海生;秦彤;赵学明;路永强;王栋
作者机构:
关键词: 免疫磁珠分选;流式细胞分析;荧光定量PCR
期刊名称: 中国生物工程杂志
ISSN: 1671-8135
年卷期: 2014 年 34 卷 07 期
页码: 38-43
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)富集纯化是利用SSCs进行基因修饰新方法等研究的前提基础。采用免疫磁珠分选法,使用干细胞抗体CD90.2进行小鼠SSCs的纯化富集,并采用流式细胞分析法和定量PCR验证了磁珠分选效率。流式细胞分析结果:免疫磁珠分选后SSCs纯度为50.11%。荧光定量PCR检测结果:磁珠分选后支持细胞特异表达基因GATA4显著下调(6倍)、SSCs表达基因GFRα-1上调(6.5倍)、生殖干细胞特异表达基因OCT4极显著上调(5.9倍),3个基因相对表达量的变化说明,免疫磁珠分选效率为6倍。流式细胞分析法所产生的偏差可能是受到了未解离磁珠及SSCs本身转基因荧光的影响。
分类号: Q954.43
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