嵌合O型口蹄疫病毒多表位基因猪细小病毒VLPs载体疫苗的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘群兴

作者： 潘群兴;诸玉梅;王永山;何孔旺;王晓丽;欧阳伟;毕振威;夏兴霞

作者机构：

关键词： 猪细小病毒;O型口蹄疫病毒;病毒样颗粒;分子设计

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2013 年 29 卷 001 期

页码： 101-107

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPVVP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDVVPl蛋白上多表位基因(VPl:21-40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDVVPl:PPVVP2,用脂质体法转染Sf9细胞.对rBac.FMDVVP1:PPVVP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒.红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV:VP2-FMDV:VPl具有与全病毒类似的血凝活性.

分类号： S858.28

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