猪传染性胃肠炎病毒NSP5蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 董慧

作者: 董慧;张鑫;陈建飞;时洪艳;石达;常铁城;谷凤丽;徐天;王智琴

作者机构:

关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;nsp5基因;单克隆抗体;抗原表位

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2015 年 37 卷 03 期

页码: 220-224

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NSP5蛋白的单抗隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达并纯化的重组NSP5蛋白(r NSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛出一株稳定分泌抗TGEV NSP5蛋白的MAb杂交瘤细胞株(5C3)。MAb亚类鉴定结果显示其抗体亚类为Ig G1/κ链。杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1∶6 400和1∶105。Western blot鉴定表明该MAb能够识别原核及真核表达的NSP5重组蛋白。利用肽扫描法鉴定显示,该MAb识别的抗原表位为286EFTPTEVIR QMYGVN300。本研究制备的MAb及其抗原表位的鉴定,为TGEV NSP5蛋白结构和功能的研究奠定了基础。

分类号: S852.651

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