猪轮状病毒NJ2012株VP8基因序列分析及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 常新见

作者： 常新见;周金柱;范宝超;郭容利;朱琳;赵永祥;牛家强;何孔旺;李彬

作者机构：

关键词： 猪轮状病毒;VP8基因;蛋白纯化;原核表达

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2020 年 010 期

页码： 68-72

收录情况： 北大核心

摘要： 为深入研究猪轮状病毒VP8蛋白的结构和功能,以及研制新型猪轮状病毒疫苗,利用生物信息学软件DNAStar对本研究室保存的1株A组G9P7型猪轮状病毒NJ2012的VP8基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析;设计并合成1对引物,采用RT-PCR方法扩增VP8蛋白编码基因,用限制性核酸内切酶对目的片段与pET28a(+)原核表达载体进行双酶切,构建了重组原核表达载体,用IPTG诱导表达,并进行Western blot验证.结果显示:NJ2012毒株的VP8基因序列与参考毒株序列的核苷酸同源性为53.9%~99.2%,氨基酸同源性为42.1%~97.5%;VP8基因克隆成功,经测序与目的基因完全一致;经鉴定,构建的重组原核表达质粒pET28a-VP8能够在DE3宿主菌中表达,该蛋白以包涵体形式存在;Western blot结果显示该蛋白可与抗His-tag鼠单克隆抗体发生特异性反应.本研究实现了VP8蛋白在原核系统中稳定表达,为调查该蛋白的免疫原性及研制安全、高效的猪轮状病毒亚单位疫苗提供了参考.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪轮状病毒OSU强毒株vp7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析. 时洪艳,冯力,陈建飞,孙东波,吴波平. 2008

[2]猪轮状病毒VP6基因的原核表达载体构建和表达. 张二芹,马强,王会岩,闫明田. 2008

[3]猪轮状病毒OSU强毒株VP7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析. 时洪艳,冯力,陈建飞,孙东波,吴波平. 2008

[4]小麦TaPDK基因的序列分析、原核表达及纯化. 杨书玲,张龙雨,张改生,桑青,刘红占,朱启迪,张新钵,赵新亮. 2013

[5]Carboxin抗性基因(Cbx~R)原核表达及多克隆抗体的制备. 李小宇,张正坤,王秋华,张春雨,张淋淋. 2015

[6]棉花咖啡酸-O-甲基转移酶基因的原核表达及蛋白纯化鉴定. 李波,倪志勇,石庆华,范玲. 2010

[7]鸡补体C3d抗血清的制备与应用. 闫敏鑫,黄秀芬,任慧英,刘杉杉,姜良,李永清. 2015

[8]小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备. 李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志. 2009

[9]口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备. 辛旭,吴香菊,齐静,王永志,李相安,杜正国,单虎,杜以军. 2021

[10]水稻组氨酸磷酸转运蛋白OsAHP2的表达及纯化. 孙丽静,李倩影,王培楠,孙颖. 2020

[11]烟草花叶病毒P54基因的原核表达与蛋白纯化. 李聪,田培洁,张宇,张德咏,刘勇,张松柏. 2021

[12]烟草NteIF2α的原核表达、纯化及多克隆抗体制备和应用. 陈德鑫,李雯雯,李思斌,李宁,郭豪,龙月,杨永霞,贾红昉,张洪映. 2017

[13]N-豆蔻酰基转移酶在大肠埃希氏菌中的表达、纯化及活性检测. 王苗苗,董虎,卢渊录,郭慧琛,孙世琪,闻晓波. 2021

[14]人7型腺病毒Hexon蛋白原核表达及蛋白纯化. 方瑞康,肖妍,李菁菁,金宁一,鲁会军,李一权,高旭,韩继成. 2024

[15]草胺膦抗性基因bar的原核表达与蛋白质纯化. 薄慧杰,卢长明,吴刚,武玉花,肖玲,白延红,陈耀锋. 2007

[16]口蹄疫病毒3D蛋白C端Th表位的重组表达及免疫功能鉴定. 王世红,张改平,卢清侠,金前跃,刘畅,常咏哲,王爱萍. 2013

[17]伪狂犬病病毒被膜蛋白pUL11和pUL16单克隆抗体的制备及初步应用. 朱婧,史智宾,杨德成,王铭,李嘉琦,王鹏飞,王靖飞. 2022

[18]猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ主要抗原表位区原核表达及其间接ELISA方法的建立(英文). 吴东,倪艳秀,何孔旺,李郁. 2014

[19]家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定. 杨杰,张海涛,翟频,白文霞,潘孝青,邵乐. 2011

[20]创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达. 李素一,吴唯维,李盼,柯翎,许斌福,林晨韬,林天龙,陈叙. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序