A型牛轮状病毒SYBR Green I RT-qPCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 焦迪

作者： 焦迪;王瑞;郝艳霞;张晓倩;崔强;王海艳;陈林军;延涵;罗晓平;李军燕;赵治国

作者机构：

关键词： 牛轮状病毒;SYBR Green I荧光RT-PCR;检测方法

期刊名称： 中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2025 年 42 卷 009 期

页码： 69-76

摘要： A型牛轮状病毒（BRV-A）是引起牛腹泻的重要病原之一，对养牛业危害最大。为建立一种针对BRV-A的快速、高通量、低成本检测方法，根据BRV-A的VP6基因保守区设计特异性引物，建立了检测BRV-A的SYBR Green I RT-qPCR方法。该方法对浓度梯度为4.41×10～8～4.41×10～2 copies/μL质粒标准品的扩增Ct值与拷贝数浓度呈良好的线性关系，熔解曲线为单峰；与其他引起牛腹泻的常见病原无交叉反应，最低检测限为4.41×10～1 copies/μL，批内、批间重复性试验Ct值变异系数均低于1%；对临床粪便样品的阳性检出率高于地方标准中的PCR方法，且检测结果符合性较好。综上，本研究建立的BRV-A SYBR Green I RT-qPCR检测方法灵敏、特异、稳定，且操作简单、成本低，为临床样品的大规模BRV-A检测及其感染的早期诊断提供了技术支撑。

分类号： S852.65

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