Cry2Aa毒素结合十二肽的筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 武爱华

作者： 武爱华;张霄;刘媛;赵扬;赵岩岩

作者机构：

关键词： Cry2Aa毒素;噬菌体展示肽库;ELISA

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2015 年 04 期

页码： 929-934

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用Cry2Aa毒素蛋白对噬菌体展示随机十二肽库进行4轮筛选,并从第4轮筛选产物中随机挑选20个单克隆,进行单克隆ELISA、PCR扩增、DNA电泳及测序,鉴定这些克隆与Cry2Aa毒素的结合活性。结果显示,这20个克隆均能与Cry2Aa毒素发生特异性结合,并推导出8条不同的序列。挑取阳性值最高的克隆GT(氨基酸序列为GTPWHHHRHLIV)建立了基于十二肽的Cry2Aa毒蛋白的间接竞争ELISA检测方法。该方法的抑制中浓度(IC50)为1.139 0μg/ml,最低检测限IC10为0.021 1μg/ml,线性检测范围为0.047 8~22.691 0μg/ml(Y=23.09 lgx+48.692,R2=0.996 3)。噬菌体展示肽库筛选方法为快速、准确地检测Cry2 Aa毒蛋白提供了新的途径。

分类号： Q785

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