汉赛巴尔通体P26蛋白基因克隆、分子特征及重组蛋白抗原特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李重阳

作者： 李重阳;孟庆玲;乔军;贡莎莎;王立霞;伍晔晖;才学鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： 汉赛巴尔通体;P26蛋白基因;分子特征;抗原特性

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2017 年 27 卷 05 期

页码： 422-427

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]研究汉赛巴尔通体(Bartonella henselae,Bh)P26蛋白的抗原特性。[方法]根据GenBank中Bh P26基因DNA序列设计特异性引物,对阳性猫血液样品进行PCR扩增,克隆测序后进行分子特征分析。构建表达载体pETP26,转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)进行诱导表达;将重组蛋白纯化后免疫小鼠,用间接ELISA抗体检测试剂盒检测抗体,分析其免疫学特性。[结果]P26基因全长738 bp,编码246个氨基酸。推导的P26蛋白氨基酸序列含有4个潜在的N-糖基化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-豆蔻酰化位点和1个信号肽序列;抗原表位主要集中在106~190位。SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明,表达的分子量为35 kDa,可与B h阳性血清发生反应;重组蛋白免疫小鼠后其血清样本Bh抗体检测结果为阳性。[结论]P26重组蛋白在大肠杆菌的高效表达且具有良好的反应和免疫原性,为进一步探讨P26蛋白在Bh感染诊断研究中的潜在价值提供前期基础。

分类号： R378

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