正交优化设计蒙药阿给ISSR-PCR反应体系

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王真

作者： 王真;刘越;孙辉;游光霞;孙洪波;申刚义;黄雪涛;毛珂;段福宇;谢龙生;蒋武霖;冯金朝;黄璐琦

作者机构：

关键词： 阿给;正交设计;ISSR-PCR;反应体系

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2010 年 38 卷 15 期

页码： 61-63

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]建立适用于蒙药阿给(Artemisia frigidaWilld.)的ISSR反应体系,为ISSR标记技术在蒙药阿给遗传多样性研究中的应用奠定技术基础。[方法]利用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶和引物浓度4因素3水平,对蒙药阿给ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对PCR的循环次数及退火温度进行试验。[结果]在20μl反应体系中,Mg2+为1.5mmol/L,dNTP为0.25mmol/L,TaqDNA聚合酶为1.5U,引物为0.75μmol/L时,且ISSR最适的循环次数为40,最适退火温度为56.0℃,扩增效果最好。[结论]筛选出的反应体系适用于蒙药阿给的ISSR扩增。

分类号： S567.19

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