Tgf2转座子多克隆位点的克隆与表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陶然

作者: 陶然;常玉梅;梁利群;唐然;窦新杰;王楠;李明云

作者机构:

关键词: 金鱼;Tgf2转座子;MCS序列;转基因斑马鱼

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2014 年 0 卷 02 期

页码: 124-129

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以金鱼pTgf2-EF1α-EGFP转座子为基础,构建含有多克隆位点(Multiple cloning sites,MCS)序列以及外源目的基因肌醇-3-磷酸合成酶(Myo-inositol-3-phosphate synthase,MIPS)的重组表达载体并注射到斑马鱼1-2期受精卵,检测重组表达载体pTgf2-EF1α-MCS-EGFP和pTgf2-EF1α-MCS-MIPS-EGFP在斑马鱼中绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达情况以及外源基因MIPS在斑马鱼体内的整合情况。荧光观察结果显示,两个重组载体均不影响EGFP的表达,只是表达强度存在一定差异,表明对Tgf2转座子的改造是有效的。转基因斑马鱼PCR检测结果显示,靶基因MIPS的编码区能够完整地整合到斑马鱼基因组中,整合效率达31.4%。重组表达载体的成功构建显示金鱼Tgf2转座子可以介导外源基因在斑马鱼中的表达,为以后Tgf2转座子在鱼类基因功能研究方面奠定了基础。

分类号: S917.4

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