双重RT-PCR方法检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢宏峰

作者： 谢宏峰;吴菊香;迟玉成;许曼琳;陈蕾;许婷婷

作者机构：

关键词： 花生条纹病毒;黄瓜花叶病毒;双重RT-PCR

期刊名称： 花生学报

ISSN： 1002-4093

年卷期： 2012 年 41 卷 01 期

页码： 16-20

摘要： 为了建立花生条纹病毒(PStV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的双重RT-PCR检测方法,根据Gen-Bank中登陆的PStV和CMV的核苷酸保守序列分别设计特异性引物,以感病叶片总RNA反转录物为模板,建立了双重RT-PCR反应体系,并对双重RT-PCR的特异性和灵敏性进行了验证。结果表明:此方法能够特异地从感染PStV和CMV的样品中扩增出PStV(300bp)和CMV(1054bp)2个条带,与实验设计相符;扩增产物测序结果表明,PStV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为93%～99%,CMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为90%～99%,证明了检测结果的准确性;该方法特异性良好,灵敏性与单一扩增相同,能够特异、灵敏、准确地检测花生CMV和PStV。

分类号： S435.652

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