高产光学纯（R）-乙偶姻工程菌株的构建与发酵工艺优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马志林

作者： 马志林;陈先锐;叶柳健;李检秀;黄艳燕;张云开;蒙健宗

作者机构：

关键词： 合成生物学;辅酶工程;工程菌株;(R)-乙偶姻;发酵优化

期刊名称： 广西科学

ISSN： 1005-9164

年卷期： 2020 年 27 卷 01 期

页码： 49-56

摘要： 本研究拟在大肠杆菌中构建光学纯(R)-乙偶姻的合成途径和利用辅酶工程调控NADH/NAD+氧化还原平衡,并对工程菌发酵(R)-乙偶姻进行优化。将来源于Enterobacter cloacae的α-乙酰乳酸合成酶基因budB、α-乙酰乳酸脱羧酶基因budA和来源于Lactobacillus brevis的NADH氧化酶基因noxE进行密码子优化后组成基因簇,构建表达质粒并导入大肠杆菌,进一步优化工程菌的培养基成分和发酵条件,提高(R)-乙偶姻的合成能力。结果表明:获得专一性合成高光学纯(R)-乙偶姻的大肠杆菌工程菌株GXASR,对其发酵条件进行系统优化后,摇瓶发酵的(R)-乙偶姻产量为36.82g/L,光学纯度达99.1%,发酵罐补料发酵的(R)-乙偶姻产量达到67.65g/L。在大肠杆菌细胞中过表达外源基因簇budB-budA-noxE能够高效合成光学纯(R)-乙偶姻,经发酵优化后,工程菌的(R)-乙偶姻产量、生产强度和得率均显著提高,为代谢工程改造大肠杆菌生产高光学纯(R)-乙偶姻提供了理论基础。

分类号： TQ920.6`TQ28

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