基于串联亲和层析法纯化并鉴定猪初乳中SIgA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨悦

作者： 杨悦;王锐;甘源;郝飞;谢星;张磊;邵国青;孟庆国;陈蓉;冯志新

作者机构：

关键词： 猪初乳;SIgA;纯化;鉴定

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2023 年 54 卷 009 期

页码： 3884-3894

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是黏膜免疫的主要效应分子,在临床上常常作为疾病早期诊断的靶标,此外,基于SIgA的治疗性单抗和靶向SIgA产生的黏膜疫苗也越来越受到关注.分离并纯化出完整且具有活性的SIgA是产品研发的前提.为了提高猪初乳中SIgA的纯化效率,本研究采用串联亲和层析,强阴离子柱和精细分子筛层析进行纯化,从10 mL初乳中获得3 mg具有活性的SIgA.使用Western blot对纯化的SIgA进行鉴定,结果表明,纯化的SIgA与抗猪的重链蛋白单抗和抗SC单抗均具有良好的反应性.使用ELISA测试SIgA与抗猪的IgA重链单抗的反应性,结果发现使用本方法纯化的SIgA较原先方法(即硫酸铵沉淀,DEAE52弱阴离子层析,Sepha-dexG-200凝胶层析和多次亲和层析的纯化方法)具有更高的反应性.最后使用质谱鉴定纯化的蛋白,结果表明为猪的SIgA.本研究为从猪初乳中纯化SIgA建立了一种高效的纯化方法,也为其它来源的SIgA的纯化提供参考.

分类号： S852.4

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