基于环介导等温扩增技术快速检测疣孢褐盘菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高洁

作者： 高洁;王楠;张娟;赵睿明;温爽;谢瑞彬;檀建新;陈爱亮

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增;有毒蘑菇;快速检测;内部转录间隔区

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2022 年 13 卷 020 期

页码： 6503-6510

摘要： 目的 基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立一种常见的有毒蘑菇(疣孢褐盘菌Peziza badia)的快速检测方法.方法 使用疣孢褐盘菌的内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)作为目的基因设计特异性的LAMP引物,使用可视化法和实时荧光法分别对LAMP扩增结果进行判断,可视化法通过颜色即可判断结果,实时荧光法观察是否有扩增曲线,两种技术相互验证.结果 本研究设计的引物特异性强,与其他阴性样品无交叉反应,可视化法和实时荧光法的检测结果一致.本方法的检出限为0.8 ng/μL;将阴性和阳性样品按比例混合,并经过水煮和人工胃液消化后提取DNA,依然能检测到含量为1%的阳性样品.结论 本方法对仪器要求低,检测速度快,操作和判断结果简单,有利于方法的传播,可用于疣孢褐盘菌的快速检测.

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