猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李玉明

作者： 李玉明;王刚;汪志艳;刘永刚;涂亚斌;王淑杰;姜成刚;王延群;蔡雪辉

作者机构：

关键词： 猪;凋亡相关基因;荧光定量PCR;SYBR GreenⅠ

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 5 期

页码： 369-373

收录情况： CSCD

摘要： 为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因的SYBR Green I qRT-PCR方法。结果显示,该方法线性关系好(R~2≥0.998),敏感性高,初始模板的检出下限为10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,批内、批间重复试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性。本研究为细胞凋亡相关因子变化趋势的研究提供方法。

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