鹅细小病毒vp2基因片段在原核系统中的表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 侯秋莲

作者： 侯秋莲;王静;刘胜旺;孔宪刚;韩宗玺;冉多良

作者机构：

关键词： 鹅细小病毒;vp2基因;克隆;表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国病毒学

ISSN： 1003-5125

年卷期： 2005 年 04 期

页码： 383-387

收录情况： CSCD

摘要： 根据鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)中国分离株HG5/82基因序列,设计引物,利用PCR技术扩增出HG5/82株vp2基因,将其克隆到pMD18-T载体后,转化入感受态细胞TG1中增殖。筛选阳性质粒,将其与原核表达载体pPROEXTMHTb分别用NcoI酶切后回收目的片断,进行定向连接,产物转化入感受态DH5α,重组质粒经酶切和测序证实目的基因正确克隆到表达载体的预期位点且插入方向正确,构建了含有HG5/82主要结构基因vp25’端969bp片段的原核表达载体。经IPTG诱导后表达出与预期大小相符的约36kDa的融合蛋白,表达形式为包涵体。薄层扫描结果表明表达产物约占菌体总蛋白的21.4%。包涵体通过6mol/L盐酸胍裂解后,利用镍离子亲和树脂进行纯化,用纯化的分子量为36kDa的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗鹅细小病毒部分结构蛋白多克隆抗体。Westernblot分析表明该多克隆抗体与HG5/82毒株具有反应性,说明该融合蛋白具有抗原性。

分类号： S852.65`Q786

  • 相关文献

[1]鹅细小病毒VP3基因的克隆及表达. 孙敏华,董嘉文,李林林,袁建丰,邝瑞欢,胡奇林. 2013

[2]鸡贫血病毒VP2基因的克隆、序列分析及表达. 杨雨辉,陈奖励. 2000

[3]鸡传染性贫血病毒VP2基因的表达及其免疫活性分析. 王晓艳,王笑梅,高玉龙,高宏雷,陆桂丽. 2006

[4]鸽子瘦素基因成熟肽重组蛋白的表达及多克隆抗体的制备. 雷明明,邵西兵,施振旦. 2017

[5]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[6]莫氏巴贝斯虫actin,aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[7]莫氏巴贝斯虫actin;aldolase和trap基因的克隆表达与多克隆抗体的制备. 王锦明,杨吉飞,李安岩,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[8]禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白P27基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备. 乔彩霞,关云涛,陈洪岩,刘怀然,蔡雪辉,李昌文,葛俊伟,刘家森. 2004

[9]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myoA和mlc的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩,殷宏,罗建勋,关贵全. 2013

[10]鸡白介素18成熟肽基因原核表达及抗血清的制备. 张海玲,冉多良,刘培欣,闫丽辉,曹殿军. 2006

[11]莫氏巴贝斯虫滑动体组件蛋白基因gap45、gap50、myo A和m/c的克隆表达与多克隆抗体制备. 王锦明,刘爱红,任巧云,马米玲,刘志杰,李安岩,李有全,赵帅阳,张浩浩. 2013

[12]中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备. 孟庆玲,才学鹏,乔军,景志忠,张艳,田广孚,郭爱疆. 2006

[13]鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用. 许萌萌,黄萌萌,牛鑫鑫,王国栋,于航博,张玉龙,韩京哲,韩金泽,刘润杭,吴子文,于晓雪,王笑梅,高玉龙,李留安,祁小乐. 2024

[14]鸭源新型鹅细小病毒DS15株生物学特性研究. 宫晓华,李琦,李传峰,张莉,唐井玉,刘光清,王桂军. 2017

[15]犬细小病毒NY株VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定. 毛倩倩,周灵,唐青海,卜宾,唐存多,焦铸锦,姚伦广,阚云超,杨建伟,崔尚金. 2016

[16]鸡贫血病毒vp2基因的表达、纯化及重组蛋白的鉴定. 黄冬艳,杨兵,齐欣,陈小玲,徐福洲. 2008

[17]蓝舌病毒1型VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达. 李扬帆,独军政,邵军军,高闪电,林彤,赵付荣,常惠芸. 2015

[18]IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达. 周宇,王永山,范红结,欧阳伟,唐雨德,王忠灿. 2010

[19]犬细小病毒VP2抗体竞争ELISA检测方法的初步建立. 赵丹,贾红,侯绍华,袁维峰,郭晓宇,柏丽华,仆仕金,朱鸿飞. 2012

[20]番鸭细小病毒和鹅细小病毒广东株VP1基因的克隆与序列分析. 季芳,张毓金,杨增岐,宋长绪. 2004

作者其他论文 更多>>

微信小程序