转基因甘蔗植株Southern杂交体系的优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 崔学强
作者: 崔学强;张树珍;沈林波;冯翠莲
作者机构:
关键词: 甘蔗;Southern杂交;地高辛;PCR法标记探针;酶切
期刊名称: 生物技术通报
ISSN: 1002-5464
年卷期: 2015 年 31 卷 12 期
页码: 105-109
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 对甘蔗Southern杂交体系的优化,旨为转基因甘蔗Southern杂交鉴定分析提供参考。以转基因甘蔗为材料,就探针不同标记方法的比较、甘蔗基因组DNA的提取、基因组DNA酶切量、酶切时间及杂交过程等方面,对地高辛标记的Southern杂交技术进行了优化研究。结果表明,改良的CTAB法提取的甘蔗DNA能满足后期实验的要求;PCR法标记探针的效率较随机引物法标记探针的效率高,更适合用于Southern杂交;40μg的DNA在400μL酶切体系中,酶切10 h可获得良好的酶切效果;杂交温度40℃,杂交18 h,可获得清晰的杂交条带。
分类号: S566.1`Q943.2
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