水稻靶标基因单碱基定向替换技术的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 严芳

作者： 严芳;旷永洁;李娜;张大伟;林宏辉;周焕斌

作者机构：

关键词： 碱基编辑器;大鼠胞苷脱氨酶;CRISPR/Cas9;功能获得性突变体

期刊名称： 中国科学:生命科学

ISSN： 1674-7232

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 1177-1185

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目前CRISPR/Cas9技术作为一种基因组定点编辑技术已经被广泛应用于不同植物中,但是对于实现特定碱基替换仍具有很大难度.本研究将APOBEC1和UGI与Cas9n融合,开发了一种包含rBE3和rBE4的高效技术,并通过该技术对OsSERK1,OsSERK2,ipa1,pi-ta和OsBRI1等基因的靶位点碱基进行编辑.在T0代转基因植物中rBE3/sgRNA将胞嘧啶碱基转换为所有其他核苷酸碱基中效率高达38.9%;利用rBE4还获得了抗稻瘟基因pi-ta的隐性等位基因靶位点胞嘧啶碱基替换为胸腺嘧啶碱基,编辑效率达18.2%.此外,在所检测的材料中,并未检测到由Cas9n切口酶引起的InDel事件.这些结果表明,rBE3和rBE4技术的开发,在未来植物基础研究和农业应用中具有广阔的前景.

分类号： Q943.2`S511

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