绵羊肺腺瘤LAMP快速诊断方法的初步建立(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘霄卉

作者： 刘霄卉;于立新;罗军荣;周艳喜;刘畅;幺宏强;周建华;马学恩

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增;绵羊肺腺瘤病毒;绵羊肺腺瘤;敏感性;组织

期刊名称： 内蒙古农业大学学报(自然科学版)

ISSN： 1009-3575

年卷期： 2013 年 34 卷 002 期

页码： 14-20

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立一种便捷、灵敏的绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)检测技术,本研究根据exJSRV LTR设计2对特异性引物,建立JSRV的LAMP(loop-mediated isothermal amplification,环介导等温扩增)检测方法,对反应体系中的MgSO4Betaine Bst DNA PoLymerase dNTP引物浓度等分别进行了优化,并进行敏感性和特异性试验.结果表明:所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用60min即可得到其特有的阶梯状条带,而且对内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)的扩增结果为阴性,该方法对JSRV前病毒DNA的最小检测限为10拷贝,灵敏性高于一步PCR方法.LAMP和特异性PCR及套式PCR方法检测临床样品的符合率分别为92%和100%.该方法为绵羊肺腺瘤病的临床检测和基层检疫提供了一种简便、实用的方法,可望在绵羊肺腺瘤病的流行病学调查及防控方面起重要作用.基于本技术的专利已获国家知识产权局批准(专利号ZL 2012 1 0274280.7).

分类号： S858.26

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