共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙建富

作者： 孙建富;赵和平;李娜;孙元;夏照和;周艳君;王煜;祁巧芬;鲁承;仇华吉

作者机构：

关键词： “自杀性”DNA疫苗;猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪瘟病毒;泛DR表位;VP22转导蛋白;共表达

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2008 年 24 卷 10 期

页码： 1714-1722

收录情况： CSCD

摘要： 为了获得新型双价“自杀性”DNA疫苗，将猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS—E2中。为了增强免疫效果，在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位（PADRE），在CSFVE2基因后融合伪狂犬病病毒（PrV）UL49基因，获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示，PRRSV GP5和CSF VE2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB／c小鼠，用间接ELISA方法检测血清抗体水平，通过基于CSFE／WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示，除pSFVlCS组外，从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体：各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖；部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4；引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。结果表明，这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫，PrvUL49可以增强其细胞免疫应答。

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