PRRSV浙江株ORF5基因的原核表达与免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 牛登元

作者： 牛登元;王一成;袁秀芳;徐丽华;刘邓;伏小平

作者机构：

关键词： 猪的生殖与呼吸系统综合征;ORF5;原核表达

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2009 年 21 卷 02 期

页码： 126-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中公布的PRRSV基因序列(EU709837),设计一对PCR引物,以浙江分离株为模板,通过RT-PCR扩增出ORF5基因全序列。以PCR技术构建了缺失信号肽及三处跨膜区的重组ORF5基因,命名为g-ORF5。将g-ORF5基因定向克隆到原核表达载体pET-28a中,转化入E.coli菌株BL21。经酶切和测序鉴定后,阳性菌株用1 mol/L IPTG诱导表达,用Ni-NTA纯化表达的重组蛋白。结果表明,重组GP5蛋白在大肠杆菌中获得表达。纯化后经ELISA和Dot-ELISA分析,表达蛋白具有免疫反应性,能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。

分类号： S852.5

  • 相关文献

[1]猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒ORF5基因的克隆与表达. 田小辉,王爱萍,乔松林,张改平,肖治军,冯丽丽,刘运超,李乔木,李卓阳. 2009

[2]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆、表达与免疫印迹. 刘焕,冉多良,王一成,袁秀芳,徐丽华. 2008

[3]2014-2017年山东省部分规模化猪场PRRSV ORF5基因的遗传演化分析. 曲向阳,孙英军,张洪亮,周磊,刘媛媛,任夫波,赖清华,夏天,周明明,杨汉春. 2018

[4]华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查. 范玉凤,邹敏,张玉玉,杨旭兵,宋健兰,吴发兴,吴家强. 2018

[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1R株致弱过程中ORF5基因遗传变异分析. 吴国军,蔡雪辉,刘永刚,王洪峰,王淑杰,石文达,马平,张琪,李成君. 2007

[6]PRRSV流行株Nsp2、ORF5和ORF3基因序列的分析. 王旭荣,张彩勤,赵炳武,张春红,杨增岐,宋长绪. 2008

[7]PRRSV HNHK3-2021毒株的ORF5和ORF7序列分析. 范悦轩,马佳镁,黄春媛,郑佳馨,陈素贞,张艳,刘光亮,曹宗喜. 2024

[8]华北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒变异分析. 焦文强,白献晓,徐引弟,王克领,郎利敏,朱文豪,李海利,张青娴,张立宪,游一,王治方,许峰. 2017

[9]2014年～2016年某大型规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传演化分析. 李真,张洪亮,张晶,张文立,刘春晓,相丽润,冷超粮,彭金美,王倩,安同庆,童光志,蔡雪辉,田志军. 2017

[10]2006年江西、河南等地猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒分离株ORF5的克隆和序列分析. 张建武,庄金山,孙志,袁世山. 2007

[11]猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株GP5基因的遗传变异与系统进化分析. 梁望旺,杨克礼,伍锐,熊忠良,刘泽文,段正赢,徐涤平. 2009

[12]PCV-2 ORF2和PRRSV ORF5基因的扩增与双基因真核表达载体的构建. 赵鸿雁,李俊,丛晓燕,曹帅,王文志,张秀美,王金宝. 2006

[13]PRRSV HuN-2011株ORF5和ORF7基因的序列分析. 贺冬梅,谭树义,陈朝喜,徐静伟,田语诗,魏玉情,曹宗喜. 2017

[14]猪无名高热病中PRRSV的RT-PCR检测(简报). 杨若耶,曾巧英,殷宏. 2009

[15]猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株ORF5基因在大肠杆菌中的表达. 陈建君,宋长绪,杨增岐,王贵平. 2005

[16]2017-2020年我国部分地区PRRSV流行毒株变异情况分析. 吴瑕,劳梦琴,谭祥梅,陈鹏飞,于家荣,朱钧锐,张玉娇,虞凌雪,高飞,姜一峰,童光志,周艳君. 2021

[17]中国部分地区高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学研究. 张建武,庄金山,袁世山. 2008

[18]山东PRRSV流行株ORF5、ORF6、ORF7基因序列的分子特征. 李俊,徐绍建,时建立,吴家强,温建新,王金宝. 2009

[19]猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒宁夏株ORF5基因遗传进化分析. 李知新,刘光远,张学军,周海宁,闫小芹,田进梅,赵燕,张和平. 2016

[20]2020-2023年甘肃猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因遗传变异分析. 焦守德,张婧,李平花,王健,韩庆彦,张雨星,魏达礼,王方洲,白兴文,卢曾军,马雪青,孙普. 2024

作者其他论文 更多>>

微信小程序