检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 童铁钢

作者： 童铁钢;白宇;张维军;王群;刘光亮;徐树兰;吴东来

作者机构：

关键词： 马白细胞介素-18;单克隆抗体;夹心ELISA

期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志

ISSN： 1007-8738

年卷期： 2009 年 25 卷 04 期

页码： 364-365+368

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleu-kin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法。方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA。结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4mg/L,检测抗体的工作效价为1∶2000。建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15ng/L,特异性良好。结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础。

分类号： R392.11

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