大肠杆菌glgC基因的克隆、序列分析与定点突变

文献类型: 中文期刊

第一作者: 董云洲

作者: 董云洲;王晓峰;贾士荣

作者机构:

关键词: AGPase;E.coli;PCR;glgC基因;序列分析;定点突变

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1006-1304

年卷期: 1999 年 7 卷 02 期

页码: 173-177

收录情况: CSCD

摘要: 通过PCR,从E.coliK12Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4%;推导的氨基酸序列的同源性为99.2%,其中,第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变,将第1007位核苦酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定名为glgC336。经I2-KI染色法鉴定,突变基因的表达可提高细菌中的糖原含量。

分类号: Q785

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