花粉管通道和农杆菌介导的花生AhFatB基因编辑

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘雷雷

作者： 潘雷雷;纪红昌;黄建斌;淮东欣;雷永;隋炯明;唐艳艳;朱虹;姜德锋;王晶珊;乔利仙

作者机构：

关键词： 花生;CRISPR/Cas9;注射浸花法;FatB;基因编辑

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2020 年 35 卷 004 期

页码： 64-70

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究CRISPR/Cas9基因编辑技术在花生中的应用,利用花粉管注射浸花法和农杆菌介导法转化花生,通过在侵染液中添加合适浓度的AS、MES以及MgCl2·6H2 O促进了转化事件的发生,并通过注射液每日现用现配最大程度地保持农杆菌的活力,提高了转化效率.本试验首次将该转化法用于基于CRISPR/Cas9技术的花生基因编辑,根据花生FatB基因序列设计编辑靶位点,成功构建CRISPR/Cas9基因编辑载体PX458-Cas9-FatB并成功转化农杆菌菌株GV3101;利用1 mL无菌注射器将当日离心配置的新鲜农杆菌侵染液注射到花生龙骨瓣中至花瓣浸透,每日8:00以前完成注射,连续注射15日,待注射花朵下针后用尼龙绳进行捆绑标记;待荚果成熟后,收获捆绑标记的花生荚果,正常晾晒干燥后剥取花生籽粒,提取籽粒基因组DNA,进行PCR扩增,筛选转化阳性籽粒.结果显示,在被检测的274粒籽粒中,有108粒扩增出了相应目的条带,转基因阳性率为39.42%;经测序验证,108粒阳性籽粒中有1粒在靶位点外发生了基因编辑,在部分阳性籽粒的自交后代中,发现了靶位点发生编辑的籽粒.因此,本研究初步证实利用注射浸花以及农杆菌介导法对基于CRISPR/Cas9技术的花生基因编辑是有效的,但编辑效率有待于进一步提高.

分类号： Q78%S565.03

  • 相关文献

[1]CRISPR/Cas9基因编辑技术在线虫中的应用进展和展望. 曹绪文,张留所. 2018

[2]CRISPR/Cas9系统在作物基因组编辑中的研究进展. 高丽,渠晖,王丽华,刘言龙,李艳阳,詹秋文,李杰勤. 2018

[3]CRISPR/Cas9基因编辑技术及在农作物品种改良研究中的应用. 郝丽芬,房永雨,燕孟娇,皇甫海燕,宋培玲,贾晓清,皇甫九茹,李子钦,韩冰. 2017

[4]利用CRISPR/Cas9技术研究玉米Zm FKF1在开花过程中的作用. 杨敏,胥华伟,王翠玲,杨护,魏岳荣. 2021

[5]CRISPR/Cas9技术及其在猪基因编辑中的应用. 刘思远,卢丹,唐中林. 2020

[6]利用CRISPR/Cas9系统定向编辑水稻SD1基因. 胡雪娇,杨佳,程灿,周继华,牛付安,王新其,张美良,曹黎明,储黄伟. 2018

[7]基因编辑CRISPR/Cas9技术在农业领域的应用. 宋丽莉,黄艳娜,蒋玮,郑洪建,赵子轶,唐雪明. 2020

[8]鸡马立克病疫苗株CVI988/Rispens meq基因编辑及缺失毒株的构建与鉴定. 杨森,滕蔓,刘金玲,周子誉,郑鹿平,楚钰淑,丁轲,余祖华,罗俊. 2020

[9]CRISPR/Cas9基因编辑技术介导SST基因敲除细胞的制备. 王紫君,任红艳,肖红卫,华再东,毕延震. 2020

[10]CRISPR/Cas9技术在农作物中应用的局限及改进. 武林琳,竹梦婕,王咪,李晓萍,刘跃鹏,裴蕾,杨淑巧,许琦,王华,郭文治. 2020

[11]利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻粒长和穗粒数性状. 沈兰,李健,付亚萍,王俊杰,华宇峰. 2017

[12]利用CRISPR/Cas9系统创制水稻品种GW2基因的突变体. 颜静宛,陈子强,周淑芬,王锋. 2024

[13]CRISPR/Cas9基因编辑技术在作物中的应用. 林萌萌,李春娟,闫彩霞,孙全喜,赵小波,王娟,苑翠玲,单世华. 2021

[14]CRISPR/Cas9基因编辑技术在果树作物中的应用研究进展. 何玉坤,欧阳嫣惟,张秀梅,林文秋,潘晓璐,张红娜. 2022

[15]利用CRISPR/Cas9技术对燕麦乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因的编辑. 于东洋,王凤梧,融晓萍,武志娟,王鑫,杨燕,韩冰,田青松. 2019

[16]基因编辑技术的发展及其在农业生产中的应用. 何利娟,徐如梦,李冬月,郑超,郑二松,梁伟芳,周洁,杨勇,陈剑平,王栩鸣,严成其. 2019

[17]水稻穗发育基因OsD1功能的初步分析. 邓尧,李懿星,王天抗,邱牡丹,宋书峰,赵学琳,李莉,刘建丰. 2018

[18]CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL. 奉宝兵,魏祥进,焦桂爱,胡时开,邬亚文,谢黎虹,圣忠华,邵高能,唐绍清. 2019

[19]碱基编辑技术在猪遗传改良中的应用研究进展. 赵无迪,黄国斌,朱向星,毕延震,唐冬生. 2023

[20]CRISPR/Cas9介导的荔枝霜疫霉基因组编辑系统的建立. 司徒俊键,江立群,邵毅,孔广辉,习平根,姜子德. 2020

作者其他论文 更多>>

微信小程序