淫羊藿ISSR-PCR反应体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 段媛媛

作者： 段媛媛;罗孝荣;周武先;游景茂;郭晓亮;卢超;郭杰

作者机构：

关键词： 淫羊藿;分子标记;ISSR;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 482-487

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻淫羊藿ISSR-PCR的各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)的最佳用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响,为进一步使用ISSR分子标记分析淫羊藿的遗传多样性提供科学依据。结果表明,筛选的最佳体系为:在20μL的体系中,模板DNA的量为30ng,2×Taq Master Mix的量为9.8μL,引物为0.325μmol/L。此外,筛选出7条多态性较好、条带稳定的引物(UBC-808, UBC814, UBC826, UBC827, UBC840, UBC846及UBC856),并对其进行温度梯度PCR,结果表明,所选引物的最佳退火温度介于46.8℃～65℃之间。在此基础上,对13份淫羊藿种质资源进行ISSR扩增验证,结果表明建立的最佳反应体系扩增效果较好,稳定性强,对淫羊藿的遗传多样性分析、鉴定等具有较好的应用价值。

分类号： S567.239

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