猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2~4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 贺云霞

作者: 贺云霞;华荣虹;周艳君;安同庆;仇华吉;王云峰;童光志

作者机构:

关键词: RNA干扰;小干扰RNA;短发夹RNA;PRRSV

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2007 年 23 卷 05 期

页码: 35-41

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: RNA干扰(RNAi)技术是基因功能研究的有效工具,为了了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)次要结构蛋白GP2、GP3、GP4在病毒复制中的作用,针对各自的编码基因ORF2、ORF3、ORF4分别选取4个小干扰RNA(siRNA)位点(共12个),构建相应的短发夹RNA(shRNA)表达载体,转染MARC-145细胞后,通过荧光定量PCR和病毒滴度检测干扰效果。筛选了可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量的ORF2、ORF3、ORF4特异shRNA表达载体,病毒效价滴定表明shRNA表达载体处理细胞可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量,细胞培养上清中的病毒滴度比对照低184~4.65倍。

分类号: S852.65

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