PDCoV N基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马翮斯

作者： 马翮斯;罗灵芝;王元红;虞凌雪;李国新

作者机构：

关键词： 猪;猪德尔塔冠状病毒;核衣壳基因;TaqMan qPCR;仔猪腹泻

期刊名称： 中国猪业

ISSN： 1673-4645

年卷期： 2025 年 20 卷 005 期

页码： 65-72

摘要： 猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种对哺乳仔猪致病性较强的病原体,感染后可导致急性水样腹泻、呕吐以及高死亡率(30%~50%),对全球养猪业危害严重.为建立一种灵敏且准确的PDCoV检测方法,本研究基于PDCoV N基因的保守序列设计特异性引物和探针,优化反应体系,成功构建了一种TaqMan荧光定量PCR(qPCR)检测方法.以PDCoV N基因重组质粒作为标准品,该方法在8.79×101~8.79×108 copies/μL范围内线性关系良好(R2=0.997,斜率=-3.236),最佳引物和探针浓度分别为0.4 μmol/L和0.2μmol/L.结果显示,该方法敏感性高,最低检测限为8.79 copies/μL;特异性强,与猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)均无交叉反应;重复性好,组间变异系数和组内变异系数均小于1.5%.本研究建立的qPCR方法可为PDCoV的临床检测和流行病学调查提供可靠的技术支撑.

分类号： S828%S852.65+1

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