禽传染性法氏囊病实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张伟业

作者： 张伟业;薛俊龙;常亚琦;刘昊;任静强

作者机构：

关键词： 禽;传染性法氏囊病;实时荧光定量PCR;SYBR GreenⅠ;毒力;鉴别诊断

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2018 年 20 期

页码： 109-111+245

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立能够快速、准确鉴别禽传染性法氏囊病病原的分子学诊断方法,试验用中、强毒力传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因编码的结构蛋白裂解位点的核苷酸序列设计引物,建立了以SYBR GreenⅠ为荧光染料的实时荧光定量PCR检测IBDV中、强毒力毒株的方法,并用该方法检测临床可疑样本。结果表明:该方法选择的引物具有特异性,其建立的标准曲线具有重复性,与模板浓度呈现良好的线性关系。在线性浓度范围内,IBDV-2512熔解曲线为单一特征峰型,熔解温度(Tm)值位于88.10～90.35℃区间,为强毒力毒株;IBDV-MB Tm值位于82.95～84.05℃区间,为中等毒力毒株。用此法检测可疑样本,测定其属于强毒力毒株,通过测序及鸡胚半数致死量(ELD_(50))的测定,验证本方法的鉴定结果正确。说明IBDV的实时荧光定量PCR检测方法建立成功。

分类号： S855.3

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