利用体外特异位点重组反应构建黄瓜灰霉菌cDNA文库

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄炜

作者： 黄炜;张宁;龙松华;邱德文;王纯利

作者机构：

关键词： 黄瓜灰霉菌;cDNA文库;体外特异位点重组

期刊名称： 新疆农业大学学报

ISSN： 1007-8614

年卷期： 2005 年 28 卷 02 期

页码： 1-4

摘要： 体外特异位点重组技术应用于cDNA文库的构建,克服了传统文库构建方法中的常见问题。本研究利用这一技术,以能够分离得到植物激活蛋白的黄瓜灰霉菌(B.cinerea)菌株为材料,用TRIZOL试剂提取总RNA,从中分离纯化出mRNA,用预先接有attB2位点的Oligo(dT)引物和SuperScriptTMⅡ反转录酶合成cDNA,双链cDNA与attB1接头连接,经重组、转化后构建了其cDNA文库。文库滴度为2.3×106pfu/mL,文库总容量达2.53×107。随机挑取24个克隆,经酶切检测,平均插入片断为1466bp,重组率达100%。

分类号： S436.421

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