基于CRISPR/Cas9的雄激素受体基因敲除的实验研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 江福能

作者： 江福能;陈冠星;梁应科;江敏耀;叶剑恒;刘文华;吴永定;何慧婵

作者机构：

关键词： 受体,雄激素;前列腺增生;前列腺肿瘤;CRISPR/Cas9

期刊名称： 中华生物医学工程杂志

ISSN： 1674-1927

年卷期： 2016 年 22 卷 004 期

页码： 283-286

摘要： 目的探讨细胞水平的雄激素受体(AR)基因敲除方法,为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列,将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR?AR载体转染T293细胞,提取DNA,PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR?AR载体测序证明质粒载体构建成功,293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR?AR载体具有95.3%的敲除效率。结论基于CRISPR/Cas9技术构建的CRISPR?AR载体可用于细胞的AR基因敲除,可进一步构建AR基因敲除的细胞株。

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