北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郭俣

作者: 郭俣;刘长青;陆涛峰;佟春玲;修晓娜;关伟军;马月辉

作者机构:

关键词: 北京油鸡;SMARTcDNA文库;purH基因

期刊名称: 南京农业大学学报

ISSN: 1000-2030

年卷期: 2010 年 33 卷 04 期

页码: 97-103

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中。转染后24、48和72h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%~53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中。随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状。结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求。

分类号: S831

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