禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李德龙

作者： 李德龙;刘在斯;贠炳岭;吴关;高玉龙;秦立廷;祁小乐;王永强;高宏雷;刘思当;王笑梅

作者机构：

关键词： 禽白血病;p27基因;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2012 年 34 卷 09 期

页码： 13-16

收录情况： 北大核心

摘要： 从J亚群禽白血病病毒(ALV-J)HB09JY03株感染的DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出约720bp的gag-p27基因片段,克隆至pMD18-T载体。鉴定正确后,将该片段克隆至pET-30a(+)原核表达载体,经IPTG诱导表达。表达产物经His Trap TMHP纯化后,测蛋白浓度达到9mg/mL。用兔抗自然p27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组p27蛋白有抗原反应活性。免疫新西兰大白兔后,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应。所制备的重组p27蛋白和多克隆抗体将在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值。

分类号： S852.65

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