牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王延群

作者： 王延群;张璐;李玉明;汪志艳;金家民;刘永刚;王刚;王淑杰;姜成刚

作者机构：

关键词： 牛IFN-α;毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 10 期

页码： 845-848

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件。结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1%甲醇浓度诱导,诱导72 h。上清中目的蛋白表达量最高可达200μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础。

分类号： S823`S852.4

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