反向PCR鉴定piggyBac介导的哺乳动物细胞转基因研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郝碧芳

作者： 郝碧芳;王猛

作者机构：

关键词： piggyBac;反向PCR;稳定表达;转基因;哺乳动物

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2011 年 40 卷 10 期

页码： 147-149+158

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用反向PCR技术,研究piggyBac介导的转基因哺乳动物中外源基因整合位点信息。首先在转座子piggyBac中插入巨细胞病毒(CMV)启动子元件驱动的绿色荧光蛋白基因(EGFP),构建用于转染哺乳动物细胞的转基因载体pXL-CMV-EGFP;同时构建以CMV启动子驱动的转座酶基因载体。将2种载体以脂质体共转染HEK293细胞,以单独的pXL-CMV-EGFP转染为阴性对照,结果表明,2个处理均观察到了绿色荧光蛋白的表达。通过反向PCR鉴定,在共转染转座酶的细胞基因组DNA中检测到外源基因的整合,而阴性对照中没有检测到,研究结果为进一步分析整合位点的信息及转基因检测提供了依据。

分类号： Q78

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