鸭瘟重组病毒穿梭载体的构建及分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘柏含

作者： 刘柏含;牛银杰;赵丽丽;弥春霞;陈洪岩

作者机构：

关键词： 鸭瘟病毒;穿梭载体;噬斑纯化

期刊名称： 实验动物科学

ISSN： 1006-6179

年卷期： 2017 年 03 期

页码： 16-19+23

摘要： 目的本研究目的为构建重组穿梭载体,拯救带有增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)重组病毒,为重组二联苗的研制奠定基础。方法选择已经证实的US区域的US2-SORF3、US7-US8和UL区域中的UL15-UL18的非编码区作为插入位点构建穿梭载体P-US2-SORF3-EGFP,P-UL15-UL18-EGFP,P-US7-US8-EGFP。在已感染疫苗毒的鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblasts,CEFs)中转染穿梭载体,经细胞同源重组,收集细胞上清,进行噬斑筛选及纯化。结果成功构建了三个带有EGFP标签的穿梭载体,p Blusecript II SK构建的穿梭载体未成功筛选到重组噬斑而用p UC18构建的穿梭载体成功筛选到重组噬斑。结论拯救鸭瘟重组毒的研究中,p Blusecript II SK载体可能不是最佳的适用载体,也可能是插入位点为病毒复制的必须区。

分类号： S852.65

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