展示口蹄疫病毒优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒制备及其在小鼠模型上的免疫原性评价
文献类型: 中文期刊
第一作者: 卢炳州
作者: 卢炳州;茹毅;郝荣增;李亚军;杨洋;杨锐;毛玉涵;蒋成辉;陶世宇;郑海学;余四九;崔燕
作者机构:
关键词: 铁蛋白纳米颗粒;口蹄疫病毒(FMDV);中和表位;T细胞表位;免疫原性
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1674-7968
年卷期: 2024 年 005 期
页码: 1216-1226
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 蛋白纳米颗粒能够在表面展现多拷贝抗原,模拟病毒的结构形态,更有利于免疫细胞摄取和促进抗原递呈,从而增强疫苗保护效力。本研究旨在利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统制备展示口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒,并评估其免疫原性。首先以幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)铁蛋白序列为基础,将FMDV优势中和表位序列插入铁蛋白第33和34位氨基酸之间,同时将耶尔森氏菌属(Yersinia) T细胞表位序列插入铁蛋白氨基酸序列的氨基末端,构建具有铁蛋白序列、B细胞表位(优势中和表位)和T细胞表位的重组表达质粒pET28a-FBT,以仅插入铁蛋白序列的重组质粒pET28a-Fer作为对照。将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达和分子筛层析纯化获得目的蛋白,利用SDS-PAGE、Western blot、粒径分析和透射电镜进行鉴定,进一步免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)评价免疫原性。结果显示,利用大肠杆菌表达系统成功制备的铁蛋白纳米颗粒FBT可与FMDV阳性血清发生特异性反应;FBT免疫14 d即产生血清抗体,并持续升高,在免疫35 d中和抗体效价最高可达1∶128;同时,FBT免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖水平和白介素2 (interleukin 2, IL-2)、IL-4、IL-10、干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)分泌水平显著高于对照组(P<0.05)。本研究制备了展示FMDV中和表位且具有良好免疫原性的铁蛋白纳米颗粒,为新型口蹄疫基因工程疫苗的研制提供技术支持。
分类号: S859.797
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