表达猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的构建及其在兔体内的免疫原性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙元

作者: 孙元;祁巧芬;梁冰冰;成丹;李娜;于墨洋;王宇飞;刘霓虹;朱庆虎;仇华吉

作者机构:

关键词: 猪瘟病毒;E2基因;重组腺病毒;免疫原性;家兔

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2008 年 24 卷 10 期

页码: 1734-1739

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了构建猪瘟重组腺病毒载体疫苗,通过细菌内同源重组法构建了含有猪瘟病毒E2基因的重组腺病毒rAdV-E2。测定其一步生长曲线,同时用间接免疫荧光试验和Western blotting检测外源基因表达,然后用rAdV-E2免疫家兔,免疫后6周用猪瘟兔化弱毒疫苗株(C株)进行攻击,攻毒后3 d取其脾脏,用实时荧光定量RT-PCR检测C株病毒RNA。结果表明,该重组腺病毒传至第10代时,毒价可达1.0×1010 TCID50/mL;外源基因可在其中得到稳定表达;rAdV-E2接种兔免疫后2周产生猪瘟特异性抗体,免疫后5 w抗体达到峰值,攻毒后rAdV-E2接种兔和C株接种兔均未出现定型热反应,从其脾脏也未检测到C株病毒RNA,而野生型腺病毒接种兔均出现了定型热反应,并且从其脾脏检测大量C株病毒RNA,其含量达到了103拷贝/μL以上。由此表明,rAdV-E2可望开发为猪瘟候选疫苗。

分类号: S852.5

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