东方马脑炎病毒VLPs表达与免疫原性研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 马金柱

作者: 马金柱;王化磊;郑学星;吴红霞;高玉伟;张志芳;杨松涛;夏咸柱

作者机构:

关键词: 东方马脑炎病毒;载体构建;病毒样粒子;免疫原性

期刊名称: 免疫学杂志

ISSN: 1000-8861

年卷期: 2014 年 06 期

页码: 26-30

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的表达东方马脑炎病毒(EEEV)病毒样粒子(VLPs),研究其免疫原性。方法采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到供体质粒pFastBacTM1上,构建成重组质粒pFastBacTM1-C-E,然后重组质粒经过基因重组作用与家蚕核型多角体病毒(BmNPV)形成重组病毒BmNPV-C-E,BmNPV-C-E被转染到BmN细胞后以表达VLPs。VLPs鉴定表达正确后,用纯化VLPs与弗氏佐剂乳化成免疫原免疫小鼠,免疫剂量为15μg/只,免疫途径为后肢肌肉注射,免疫2次且间隔时间为14 d。2免后第7天检测免疫小鼠外周血中CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,2免后第14天采用ELISA方法检测免疫小鼠血清内抗体IgG效价。结果研究结果显示实验组小鼠的CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α质量浓度与对照组相比差异均显著(P<0.01),免疫原实验组和VLPs免疫组2免后的血清效价分别为1∶128与1∶64,而对照组小鼠血清中没有产生IgG抗体。结论结果表明BmNPV-C-E能在BmN细胞中成功表达EEEV VLPs,并且VLPs能够刺激小鼠产生明显免疫反应,具有较强免疫原性,这为EEEV新型疫苗研究提供了重要参考。

分类号: S852.65

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