Caco-2细胞TLR2和TLR4对微小隐孢子虫刺激信号的识别

文献类型: 中文期刊

第一作者: 余裕强

作者: 余裕强;宫鹏涛;孙铭飞;李建华;杨举

作者机构:

关键词: 微小隐孢子虫;Caco-2;TLR;NF-Κb

期刊名称: 中国病原生物学杂志

ISSN: 1673-5234

年卷期: 2015 年 02 期

页码: 148-151

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目的研究Caco-2细胞在微小隐孢子虫感染后TLRs的激活情况。方法微小隐孢子虫子孢子刺激Caco-2细胞后,通过qRT-PCR检测TLRs mRNA的表达水平,采用Western blot检测NF-κB激活情况,采用ELISA检测IL-8的分泌量。同时,在微小隐孢子虫子孢子感染Caco-2细胞前加入TLR2或TLR4的抑制剂,检测NF-κB激活情况以及IL-8的分泌情况。结果将Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子2h后,提取的RNA反转成cDNA,采用普通PCR进行检测,结果表明Caco-2能够表达所有10种人TLRs;qRT-PCR检测刺激组与对照组TLRs表达量,经spss分析,p<0.01,刺激组TLR2和TLR4的表达量较对照组显著上调。对Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子1h后提取的细胞全蛋白进行Western blot,显示NF-κB激活水平较对照组显著上调;Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子12h后收集的细胞培养上清经ELISA检测,IL-8分泌量由刺激前的65.23pg/ml显著上调至488.23pg/ml。而在微小隐孢子虫子孢子感染Caco-2细胞前加入TLR2或TLR4的抑制剂,NF-κB激活水平和IL-8的分泌量较未加抑制剂感染组均显著下调,IL-8的分泌量分别降至204.02pg/ml(抑制TLR2活性后)和142.79pg/ml(抑制TLR4活性后)。结论 Caco-2细胞的TLR2和TLR4参与对微小隐孢子虫子孢子的识别。

分类号: R382.3

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