菊花倍性流式细胞术快速检测方法的优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 郭 艳超

作者: 郭 艳超;侯 宇航;陈 菊;徐 彦杰;孟 静柔;郑 伶杰;姚 玉涛;张 国君

作者机构:

关键词: 菊花;倍性检测;流式细胞仪;方法优化;快速鉴定

期刊名称:

ISSN: 1007-4333

年卷期: 2025 年 30 卷 7 期

页码: 119-130

摘要: 为建立大批量快速鉴定菊花倍性的流式细胞术,以二倍体菊花野菊和六倍体菊花‘秋艳’为材料,采用3种方法制备细胞核悬浮液,通过比较3种方法测定倍性的优劣,确定了研磨器研磨法为最优方法,并对研磨器研磨法中的裂解液、研磨器转速、裂解时间、过滤尼龙网目数、染色时间5个因素进行了探究。结果表明:1)3种样品制备方法均可准确判断倍性,刀片切碎法制备的样品流式细胞检测图峰型较好,耗费时间最长;研钵研磨法峰型中等,耗费时间适中;研磨器研磨法峰型中等,耗费时间最短。2)在研磨器研磨法中采用Otto裂解液、1 200~1 400 r/min研磨转速、裂解时间0 min、200~500目尼龙网、染色时间5 min处理样品速度较快,检测效果较好。综上,基于流式细胞仪的研磨器研磨法,其检测结果同研钵研磨法、刀片切碎法制备样品一样准确,还可实现批量快速鉴定菊花的染色体倍性,为菊花的倍性鉴定提供了快捷可靠的技术方法。

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