双价杀虫蛋白基因在荧光假单胞菌中的表达及增效

文献类型： 中文期刊

第一作者： 丁之铨

作者： 张杰;宋福平;黄大昉;李季伦

作者机构：

关键词： 荧光假单胞菌;杀虫晶体蛋白;cry1 Ac基因;cry2 Aa基因;增效作用

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 1005-7021

年卷期： 2000 年 40 卷 06 期

页码： 573-578

收录情况： 北大核心

摘要： 利用广宿主质粒载体 pJMS6α lac将苏云金芽胞杆菌 (Bacillusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因cry1Ac和cry2Aa基因分别及一起进行克隆 ,将重组质粒导入能在多种作物上定殖、对植物病菌有良好抑菌和防治作用的荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescens)P30 3菌株 ,分别得到工程菌株IPP1 0 1、IPP2 0 1和IPP2 0 2。PCR RFLP和Southernblot检测均证明目的基因已经导入了工程菌。SDS PAGE电泳显示工程菌中存在明显的Cry1Ac蛋白带 ;透射电镜观察发现含cry1Ac基因的两个菌株IPP1 0 1和IPP2 0 2中杀虫蛋白形成了典型的菱形晶体和蛋白包含体 ,而在野生P30 3菌株中均无这些结构。这些结果说明 ,工程菌中cry1Ac基因得到了很好表达。室内杀虫试验表明 :工程菌对棉铃虫初孵幼虫的致死中浓度 (LC50 ) ,只含cry1Ac的IPP1 0 1为 0 0 0 81 2mL/g饲料 ,只含cry2Aa的IPP2 0 1为 0 0 2 60 4mL/g饲料 ,含双基因的IPP2 0 2为 0 0 0 1 86mL/g饲料 ;HD73为 0 0 0 1 70mL/g饲料。cry1Ac和cry2Aa双基因表达产物具有显著增效作用 ,共毒系数达 332 8。

分类号： Q786

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