转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 聂淑晶

作者： 聂淑晶;武玉花;吴刚;肖玲;卢长明

作者机构：

关键词： GMO;事件特异性检测;定性PCR;RF1转化事件;左边界旁侧序列

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2008 年 30 卷 03 期

页码： 265-271

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列。根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失。根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp。利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%)。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法。

分类号： S565.4

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