橡胶树花序总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王亚杰

作者： 王亚杰;位明明;李维国;王祥军;高新生

作者机构：

关键词： 橡胶树花序;蛋白组学;蛋白提取;双向电泳

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2016 年 08 期

页码： 2083-2089

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以橡胶树热研7-33-97花序为试验材料,分别采取3种蛋白质提取方法(TCA/丙酮法,酚抽提法和Tris-丙酮-酚法)提取橡胶树花序总蛋白。对3种蛋白质提取方法的蛋白提取率、单向SDS-PAGE电泳和双向电泳结果进行分析比较,结果表明3种方法中TCA/丙酮法的提取率最高(6.09±0.22)mg/g,单向SDS-PAGE电泳条带清晰且较完整,双向电泳后获得的蛋白点最多(994±25),是建立橡胶树花序蛋白质组学研究体系的较好方法。进一步对基于TCA/丙酮法提取的橡胶树花序总蛋白质双向电泳体系进行优化,结果显示利用p H范围为4~7的IPG胶条,在聚焦时间为7.0×10~4 Vh、蛋白上样量为1.0×10~3μg,以及12.5%凝胶浓度条件下,考马斯亮蓝染色法获得的橡胶树花序蛋白质双向电泳图谱质量最好,可为橡胶树生殖发育相关蛋白质组学研究奠定良好基础。

分类号： S794.1

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