绵羊INHBB、SMAD4和FGF18基因的双荧光素酶载体构建及其与miR-370-3p的靶向验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李芝丰

作者： 李芝丰;储明星;孙伟

作者机构：

关键词： 抑制素亚基βB;SMAD家族成员4;成纤维细胞生长因子18;miR-370-3p;双荧光素酶

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN：

年卷期： 2021 年 009 期

页码： 3109-3117

收录情况： 北大核心

摘要： 为研究绵羊输卵管功能相关的oar-miR-370-3p与抑制素亚基βB（inhibin subunit beta B,INHBB）、SMAD家族成员4（SMAD family member 4,SMAD4）和成纤维细胞生长因子18（fibroblast growth factor 18,FGF18）基因之间的靶向关系,本研究对多个物种（绵羊、人、小鼠、大鼠、猕猴、豚鼠和兔）中miR-370-3p的序列进行了比对,利用RNAhybrid程序预测绵羊miR-370-3p与INHBB、SMAD4和FGF18基因的3′UTR可能存在的结合位点,随后分别构建INHBB、SMAD4和FGF18基因3′UTR的野生型和突变型双荧光素酶载体,并将其与miR-370-3p mimics、mimics NC共转染至HEK293T细胞,检测双荧光素酶活性。结果表明,绵羊miR-370-3p序列与其他6个物种不同,但具有一定的保守性。RNAhybrid程序预测到oar-miR-370-3p与INHBB、SMAD4和FGF18基因的3′UTR存在结合位点。PCR扩增结果和测序结果表明,INHBB、SMAD4和FGF18基因3′UTR的野生型和突变型载体构建成功。共转染INHBB、SMAD4和FGF18野生型载体和miR-370-3p mimics的双荧光素酶活性极显著或显著低于相应的对照组（P<0.01;P<0.05）;而3种突变型载体和miR-370-3p mimics共转染的双荧光素酶活性均与相应的对照组无显著差异（P>0.05）。表明INHBB、SMAD4和FGF18基因的3′UTR区域均能与miR-370-3p结合并抑制双荧光素酶活性,验证了INHBB、SMAD4和FGF18基因均是miR-370-3p的靶基因,为进一步研究oar-miR-370-3p影响绵羊输卵管功能与绵羊繁殖力的分子机制提供依据。

分类号： S826

  • 相关文献

[1]基于AncBE4max系统精准编辑绵羊成纤维细胞FGF18基因. 蒙亚琦,王嵩,杨鹏,于航,姚旭东,郭延华,唐红,张译元,王立民,周平. 2025

[2]miR-370-3p在绵羊中的表达、生物信息学分析与靶基因预测. 王丹,张双双,贾琪,张新玉,付佳棋,张立春,孙福亮. 2024

[3]绵羊甲状腺miR-370-3p靶向COL4A3基因调控繁殖力性状的初步研究. 常成,张茜,贺小云,储明星,梁琛. 2023

[4]猪NLRC5基因启动子克隆及生物信息学分析. 刘翔,尹灵丹,薛美,李亮,赵立媛,蒋成凡,王文哲,冯力,刘平黄. 2021

[5]牦牛VEGFA双荧光素酶载体构建及与miR-200b的靶向验证. 谢建鹏,陈平,王斐,何振富. 2023

[6]苦荞b HLH93转录因子响应铝胁迫的功能研究. 刘桐,王志荣,李伟,刘洋,王祥儒,赖弟利,何毓琦,张凯旋,赵振军,周美亮. 2024

[7]麒麟鸡miRNA-1623与靶基因Wnt4的靶标验证分析. 李珊珊1,2孙红梅2　张伟2　董振2　李春义2*　杜炳旺1*. 2016

[8]低氧胁迫下鲢miR-17a-5p及其靶基因分析. 李晓晖,冯翠,王巧欣,邹桂伟,梁宏伟. 2023

[9]肉牛DKK3基因3'UTR双荧光素酶报告质粒构建及与miR-25的靶向验证. 张凤,陈明新. 2022

[10]麒麟鸡miRNA-1623与靶基因Wnt4的靶标验证分析. 李珊珊,孙红梅,张伟,董振,李春义. 2017

作者其他论文 更多>>

微信小程序