稻曲病菌致病力丧失突变菌株B-1015的T-DNA标记基因的克隆

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄磊

作者： 黄磊;胡建坤;俞咪娜;于俊杰;王亚会;郑梦婷;郑睿;刘永锋

作者机构：

关键词： 稻曲病菌;致病力;T-DNA;基因克隆

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2014 年 47 卷 13 期

页码： 2552-2562

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】研究稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)致病力丧失突变菌株B-1015,克隆和分析T-DNA插入位点的侧翼序列,为稻曲病菌的致病机制研究提供参考。【方法】分析稻曲病菌T-DNA插入突变体B-1015菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率以及致病力等生物学表型。用PCR检测T-DNA在B-1015基因组中插入的稳定性,用Southern杂交检测T-DNA插入的拷贝数,用hiTail-PCR扩增T-DNA侧翼序列,用RACE PCR克隆T-DNA标记基因,半定量RT-PCR分析所克隆基因的表达情况。【结果】与野生菌株P1相比,突变菌株B-1015的生长速率和产孢量都有较明显的降低,孢子萌发率无明显差异,致病力丧失。分子检测结果表明T-DNA在B-1015基因组中为稳定的单拷贝插入。hiTail-PCR得到的T-DNA两端侧翼序列在野生型菌株基因组上不相连,RACE PCR在两边的侧翼序列上分别克隆得到Uvt-1015R和Uvt-1015L。预测分析表明Uvt-1015R包含一个长度为948 bp的开放阅读框(open reading frame finder,ORF),可编码295个氨基酸,5′端非编码区(5′-untranslated regions,5′-UTR)长度为341 bp,3′端非编码区(3′-untranslated regions,3′-UTR)长度为271 bp。Uvt-1015L包含一个长度为351 bp的ORF,可编码116个氨基酸,5′-UTR为31 bp,3′-UTR长度为174 bp。在已知功能的蛋白中检索,没有发现与Uvt-1015R和Uvt-1015L基因同源的蛋白。序列分析发现T-DNA插入在两个基因序列中间,RT-PCR结果显示,在突变菌株B-1015中,Uvt-1015R表达量下降,Uvt-1015L不表达。【结论】稻曲病菌突变菌株B-1015致病力等重要生物学表型发生改变,可能是由于T-DNA的插入导致了B-1015基因组重排和Uvt-1015R、Uvt-1015L基因结构的破坏。

分类号： S435.111.4

  • 相关文献

[1]稻曲病菌T-DNA插入突变菌株B1241侧翼基因克隆. 薄惠文,俞咪娜,于俊杰,尹小乐,丁慧,王亚会,刘永锋. 2016

[2]稻曲病菌T-DNA插入突变体5062的插入位点分析. 俞咪娜,胡建坤,黄磊,于俊杰,尹小乐,聂亚锋,陈志谊,刘永锋. 2013

[3]柱花草炭疽菌致病力丧失突变菌株1869的T-DNA插入位点侧翼序列的克隆. 许沛冬,郑肖兰,赵艳,李秋洁,吴伟怀,贺春萍,习金根,梁艳琼,郑金龙,戚山江,张晓波,易克贤. 2015

[4]稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆. 黄磊,俞咪娜,胡建坤,于俊杰,尹小乐,聂亚锋,陈志谊,刘永锋. 2013

[5]油菜黑胫病菌T-DNA插入致病力减弱突变体的筛选及侧翼序列分析. 皇甫海燕,史志丹,郝丽芬,燕孟娇,宋培玲,杨永青,贾晓清,皇甫九茹,郭晨,李子钦. 2021

[6]大丽轮枝菌致病缺陷型T-DNA插入突变体的筛选与鉴定. 崔伟业,周雷,单柳颖,张君,戴小枫,郭维. 2018

[7]稻曲病菌T-DNA插入突变体B2510的插入位点分析. 丁慧,俞咪娜,王亚会,于俊杰,尹小乐,薄惠文,黄星,刘永锋. 2016

[8]稻曲病菌生物学特性与致病力相关性研究. 李燕,尹小乐,刘永锋,于俊杰,陈志谊. 2012

[9]安徽水稻稻曲病群体菌遗传结构及致病力研究（英文）. 苏贤岩,任学祥,谷春艳,胡飞,王学峰,吴向辉. 2016

[10]稻曲病菌产孢能力及致病力测定. 李燕,于俊杰,刘永锋,尹小乐,张荣胜,俞咪娜,陈志谊. 2012

[11]来源于同一穗不同稻曲球的稻曲病菌的致病性及遗传多样性. 俞咪娜,陈志谊,于俊杰,胡建坤,尹小乐,聂亚锋,刘永锋. 2013

[12]稻曲病菌T-DNA插入突变体B1464插入位点分析. 王亚会,刘永锋,陆凡,俞咪娜,黄磊,郑梦婷,于俊杰,尹小乐. 2015

[13]稻曲病菌培养特性及致病力研究. 冯爱卿,杨健源,曾列先,陈深,苏菁,李落叶,李建雄,朱小源. 2014

[14]稻曲病的接种方法及其效果初探. 张君成,张炳欣,陈志谊,刘永锋,陆凡. 2003

[15]福建地区稻曲病菌生物学特性及致病力分析. 刘航,甘林,代玉立,杨秀娟,肖顺. 2025

[16]T-DNA标签技术及其在植物功能基因组研究中的应用. 杨永智. 2006

[17]快速筛选拟南芥受精和早期胚胎发生相关基因的方法. 李鑫波,严海龙,陈丹,孙蒙祥,彭雄波. 2015

[18]拟南芥突变体构建方法及目的基因分离鉴定技术. 孙万刚. 2010

[19]共转化水稻植株T-DNA共整合结构的分子分析. 赵建华,李亚丽,刘中来,瞿绍洪. 2013

[20]转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究. 李亚丽,刘中来,周洁,徐国娟,瞿绍洪. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序