半滑舌鳎WT1a基因的克隆与性别分化期的表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张红

作者： 张红;陈松林;刘洋;温海深;朱颖;ZHU Ying

作者机构：

关键词： 半滑舌鳎;性别相关基因;WT1a;实时荧光定量PCR

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2014 年 01 期

页码： 26-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)全基因组序列中获得肿瘤抑制基因WT1a的部分序列,然后利用RACE技术克隆了WT1a基因的全长,运用组织学方法,对半滑舌鳎性腺分化早期的组织切片进行了观察,并分析了该阶段WT1a的表达特征。克隆结果显示,WT1a基因cDNA全长为1 886 bp,开放阅读框(ORF)长为1 470 bp,编码490个氨基酸,并且包含KTS三肽,5′-UTR和3′-UTR分别长为245 bp和171 bp。在ORF末端发现2个微卫星(SSR)序列和2个跨膜螺旋区域,而在其他物种中未发现这些区域。氨基酸序列分析显示,WT1a基因的保守性很高,与人的同源性高达90%。通过组织切片观察发现,该批半滑舌鳎在56 d时性腺开始分化,并且卵巢分化早于精巢。荧光实时定量分析结果显示,WT1a在半滑舌鳎成鱼性腺中表达量显著高于其他各组织,在肝、肾、脾、心脏等组织中有微量表达,并且在成鱼性腺中,雄鱼表达量显著高于雌鱼,雌鱼显著高于伪雄鱼。在胚胎发育各时期以及初出膜后WT1a的表达结果显示,在12 h(原肠早期)显著升高,20 h(神经胚期)达到最高。在性腺分化早期雌雄性腺中的表达结果显示,WT1a在雌雄半滑舌鳎16~66 d的性腺中表达量持续平稳升高,在性腺分化时期表达量并没有特殊的变化。这些研究结果说明,WT1a基因是半滑舌鳎性别相关基因,并在半滑舌鳎的性腺分化、发育过程中持续表达,但可能对性腺的分化过程并不起决定作用。

分类号： S917.4

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