大菱鲆抗鳗弧菌急性感染家系的筛选和免疫表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杜普贺

作者： 杜普贺;夏苏东;王会林;高夏;黄智慧;李杰

作者机构：

关键词： 大菱鲆;鳗弧菌;抗病性状;免疫应答

期刊名称： 渔业研究

ISSN： 2096-9848

年卷期： 2025 年 47 卷 005 期

页码： 661-670

摘要： [背景]鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是大菱鲆(Scophthalmus maximus)的重要病原,其发病迅速,致死率高.感染鳗弧菌的大菱鲆幼苗在 2~3 d内的死亡率可达 80%以上,严重影响了大菱鲆养殖产业的发展.[目的]筛选出大菱鲆抗鳗弧菌免疫相关基因和抗病家系.[方法]本研究选取 8 个不同家系(A~H)的大菱鲆,通过人工感染实验,比较不同家系感染鳗弧菌后的成活率,并分析 12 个大菱鲆免疫相关基因(il-1β、mx、nkef、tnf-α、il8r、tlr5、mhc-Ⅰ、mhc-Ⅱ、IgM、tcr、cd4 和cd8)和 3 个免疫因子[补体C3、溶菌酶(LZM)和酸性磷酸酶(ACP)]在鳗弧菌感染前期的作用.[结果]攻毒结果显示,大部分感染鳗弧菌的大菱鲆在 2~3 d内死亡;在感染 10 d后,A家系存活率为 13.15%,G家系存活率为 10.52%,其余家系全部死亡.免疫因子测定结果显示,在攻毒 24 h时,D、F家系补体C3 含量显著升高(P<0.05),A、G家系ACP活性显著升高(P<0.05).免疫相关基因实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果显示,在攻毒 24 h后,A家系tnf-α、tlr5、tcr、cd4、cd8 基因显著上调,其中tlr5 基因上调约 7 倍,cd8 基因上调约 20 倍;G家系mx、tnf-α、tlr5、tcr、cd4、cd8 基因显著上调,其中tlr5 基因上调约 2 倍,tcr基因上调约 8 倍.整体来说,攻毒后A、G家系免疫系统强协同响应,预示其能快速识别病原、募集免疫细胞并启动特异性杀伤;结合攻毒后两家系的群体存活率结果来看,A、G家系对鳗弧菌感染的抵抗能力最强,可作为鳗弧菌的高抗病潜力家系.C、E家系il-1β、tcr、cd8 基因显著上调,F家系补体C3 含量和il-1β、mx、tnf-α基因显著上调,H家系il-1β、tlr5、tnf-α基因显著上调,但其他通路(如il8r、cd4 等)应答平缓,免疫激活呈现局部通路优势;在鳗弧菌感染前期,C、E和F家系依赖单一、局部通路抵御感染,其免疫应答的广度与深度均弱于A、G家系,推测其对鳗弧菌的抗病性为中度.B、D家系在攻毒后仅少数基因(如D家系il-1β等)微弱响应,免疫通路激活整体滞后,对鳗弧菌感染的抵抗力最弱.[结论]综上所述,A、G家系更适合作为抗鳗弧菌急性感染的家系群体,并从这些家系中初步筛选出6 个对鳗弧菌感染较为敏感的免疫基因(mx、tnf-α、tlr5、tcr、cd4 和cd8),并可作为大菱鲆抗鳗弧菌家系选育的标记基因,为选育大菱鲆抗性品种提供理论数据.

分类号： S917.4

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